Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manual (Página 8)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Instrucciones de uso TA9217 ES-CE-Rev_D 08/04/2013
Tabla 2: Leica HER2 FISH System - 30 Test Staining Protocol predeterminado
F. Procedimiento detallado
Estas instrucciones deben leerse conjuntamente con el manual de usuario Leica BOND-
MAX and BOND-III System. Debe utilizarse un nuevo Leica BOND Universal Covertile con
cada portaobjetos.
El uso de Leica BOND Universal Covertiles que hayan sido previamente utilizados para
tinción inmunohistoquímica o para hibridación in situ no se ha validado para esta prueba.
1 En el Leica BOND-MAX and BOND-III System, compruebe que la capacidad de los
contenedores a granel y de los contenedores para desechos peligrosos es suficiente
para realizar los ciclos de tinción necesarios.
2. Asegúrese de que los contenedores de reactivos a granel contienen alcohol, agua destilada
o desionizada, Leica BOND Dewax Solution, Leica BOND Epitope Retrieval Solution 1 y
Leica BOND Wash Solution para realizar los ciclos de tinción necesarios.
3. Compruebe que se ha instalado una Leica BOND Mixing Station limpia.
4. Ponga en marcha el Leica BOND-MAX and BOND-III System.
5. Ponga en marcha el PC acoplado al Leica BOND-MAX and BOND-III System.
6. Abra el software Leica BOND.
7. Para un nuevo kit Leica HER2 FISH System - 30 Test , escanee el código de barras de
la bandeja de reactivos con el escáner portátil para introducir el sistema en el inventario
de reactivos de Leica BOND (solo un código de barras único).
8. Prepare Leica BOND Enzyme 5 en el Leica BOND Open Container suministrado con
una dilución de 1:300. Por ejemplo, para 10 portaobjetos, añada 10 µl de Leica BOND
Enzyme Concentrate 2 a 2990 µl de Leica BOND Enzyme Diluent.
9. Escanee el Leica BOND Open Container suministrado y regístrelo como Bond Enzyme 5.
10. Vaya a la pantalla Slide setup y haga clic en Añadir caso.
11. Introduzca los detalles del primer caso. Compruebe que el volumen de dispensación se
ha fijado en 150 µl y que el protocolo de preparación es *Dewax. Haga clic en OK.
12. Con el caso resaltado en la pantalla Slide setup, haga clic en Añadir portaobj..
13. En primer lugar, añada portaobjetos de pruebas de pacientes. Compruebe que el tipo de
tejido está ajustado en Tejido de prueba.
14. Seleccione el modo de tinción Única.
15. Seleccione el proceso ISH.
16. Seleccione *LSI HER2/CEP17 Dual Probe – 30 Test de la lista de sondas. La ficha Protocols
muestra de forma predeterminada el protocolo de tinción correcto (*FISH Protocol A),
protocolo HIER (*HIER 25 min with ER1 (97)), protocolo EIER (*Enzyme 5 for 25 min),
desnaturalización (*D10) e hibridación (*ISH Hybridization (12Hr)).
17. Repita los pasos del 10 al 16 hasta que los portaobjetos de prueba del paciente y los controles
(portaobjetos de control y/o controles internos Leica HER2 FISH) se hayan creado.
Imprima las etiquetas de los portaobjetos.
18. Coloque adecuadamente las etiquetas en los portaobjetos.
19. Abra las tapas de todos los contenedores del Leica HER2 FISH System - 30 Test y
cargue la bandeja de reactivos en el Leica BOND-MAX and BOND-III System.
20. Aplique nuevos Covertiles a cada portaobjetos.
21. Cargue la bandeja de portaobjetos en el Leica BOND-MAX and BOND-III System y pulse el
botón Carga/Desc.
22. Confirme que los portaobjetos se han escaneado y haga clic en el botón Run (Play) en
la pantalla de estado System para iniciar el ciclo inmediatamente (para el Leica HER2
FISH System - 30 Test se recomienda que este ensayo se realice por la noche mediante
la funcionalidad de inicio retardado).
23. Compruebe que el campo del indicador de bandeja muestra Proc (OK) y que se visualizan
el número de lote y el tiempo de finalización.
24. Cuando haya completado el ciclo, pulse el botón Carga/Descarga y retire la bandeja de
portaobjetos del Leica BOND-MAX and BOND-III System.