Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manual (Página 14)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Instrucciones de uso TA9217 ES-CE-Rev_D 08/04/2013
Control de calidad
Uso de los portaobjetos de control
Se recomienda incluir un Leica HER2 FISH Control Slide en cada ciclo de prueba para controlar
el rendimiento del ensayo y para evaluar la precisión de la enumeración de las señales. Los
portaobjetos de control deben utilizarse para cada lote de tinción en el Leica BOND-MAX and
BOND-III System y con cada nuevo lote de reactivo. Además, los usuarios individuales pueden
elegir utilizar su propio material de control.
Evalúe la calidad del portaobjetos de control y realice la enumeración de señales según las
instrucciones de la sección Evaluación y enumeración de señales. Los criterios para la
calidad del portaobjetos deben cumplirse y los resultados de la proporción HER2:CEP17 deben
encontrarse dentro de los rangos establecidos para un rendimiento de la prueba aceptable.
Consulte en la tabla 3 los criterios de aceptación de Leica HER2 FISH Control Slides.
Línea celular Perfil del
Bond Oracle
HER2 IHC
System HER2 Carga
del receptor
por célula* Leica HER2 FISH System - 30 Test
Criterios de aceptación HER2:CEP17
SKBr-3 3+ 4,3 x 10 5 Se observa la amplificación de HER2
MDA-MB-453 2+ 1,4 x 10 5
La proporción entre los genes HER2/CEP17
debe encontrarse entre
1,5-2,5
MDA-MB-175 1+ 6,3 x 10 4 No se observa la amplificación de HER2
MDA-MB-231 0 9,3 x 10 3 No se observa la amplificación de HER2
*Análisis de la carga de receptor HER2, evaluada mediante citometría de flujo.
Tabla 3: Interpretación de Leica HER2 FISH Control Slide.
Si los controles del ensayo fallan, los resultados de FISH para este caso no deben notificarse.
Si los portaobjetos de control no cumplen los criterios de aceptación de los portaobjetos, es
posible que el Leica HER2 FISH System - 30 Test no se haya realizado correctamente. En este
caso, será necesario repetir la prueba con nuevos portaobjetos de control y portaobjetos de
muestras de pacientes. Si los resultados se encuentran fuera del rango especificado, pero los
portaobjetos de control cumplen los criterios de aceptación para la calidad, es recomendable
repetir el screening del mismo portaobjetos, ya que es posible que la enumeración no se haya
realizado correctamente. Consulte la guía de resolución de problemas (tabla 6), en el caso de
un fallo de hibridación, tanto en los portaobjetos de la muestra como en los de control.
Para las muestras clínicas, si resulta difícil interpretar la señal de hibridación y la muestra es
insuficiente para repetir el ensayo, la prueba no tendrá ningún valor informativo. Si el número de
células disponibles es insuficiente, la prueba no tendrá ningún valor informativo.
Las muestras de los pacientes deben controlarse según los procedimientos operativos
de laboratorio estándar. La calidad de la señal y los resultados de la enumeración deben
documentarse en un formulario de informe adecuado.
Limitaciones
A. Limitaciones generales
FISH es una técnica que requiere una formación especializada en todos los aspectos del
procedimiento (incluyendo la selección de los reactivos, tejidos, fijación, procesamiento y
preparación de portaobjetos adecuados) y de la interpretación. La tinción de tejidos varía en
función de la manipulación, la fijación y el procesamiento del tejido antes de su tinción. Una
inapropiada fijación, congelación, descongelación, lavado, secado, calentamiento, corte o la