Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manual (Página 6)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Instrucciones de uso TA9217 ES-CE-Rev_D 08/04/2013
tejidos (19). Se recomienda preparar los tejidos empleando fijadores a base de formalina, procesarlos
de forma rutinaria e incluirlos en parafina. Así, por ejemplo, las muestras deben realizarse con un
grosor de 3–4 mm y deben fijarse durante 18–24 horas en formalina tamponada neutra al 10%.
A continuación, los tejidos deben deshidratarse en una serie de alcoholes y clarificarse con xileno.
Acto seguido, debe realizarse una impregnación con cera de parafina fundida, mantenida a una
temperatura máxima de 60 °C. Las muestras de tejido deben cortarse entre 4-6 µm.
Los cortes de tejido montados en portaobjetos cargados (Leica BOND Plus Slides S21.2113)
se pueden conservar hasta 12 meses a 2–8 °C antes de la tinción. Después del corte, se
recomienda incubar los portaobjetos a 60 °C durante una hora. Los cortes teñidos deben
almacenarse a -20 °C para conservar la señal fluorescente y evitar la pérdida de intensidad.
Los portaobjetos almacenados deben alcanzar la temperatura ambiente antes de la lectura.
Advertencias y precauciones
Solo para usuarios profesionales.
Uno o varios componentes del producto son peligrosos y pueden resultar perjudiciales para el
feto.
Como regla general, las personas con edad inferior a los 18 años no podrán utilizar este producto.
Los usuarios deben ser debidamente instruidos acerca del procedimiento de trabajo adecuado,
las propiedades peligrosas del producto y las instrucciones de seguridad necesarias.
Las muestras, antes y después de ser fijadas, y todos los materiales expuestos a ellas, deben
tratarse como sustancias capaces de transmitir infecciones y deben eliminarse tomando las
precauciones adecuadas.
Nunca pipetee los reactivos con la boca y evite el contacto de los reactivos y de las muestras
con la piel y las membranas de la mucosa. Si los reactivos o las muestras entran en
contacto con zonas sensibles de su cuerpo, lávelas con abundante agua. Busque asistencia
médica. Consulte la normativa estatal, regional o local sobre la eliminación de componentes
potencialmente tóxicos.
Minimice la contaminación microbiana de los reactivos para evitar un posible aumento de la
tinción inespecífica.
Procedimiento
A. Reactivos necesarios no suministrados
• Leica BOND Dewax Solution (AR9222)
• Leica BOND Epitope Retrieval Solution 1 (AR9961)
• Leica BOND Wash Solution x10 Concentrate (AR9590)
• Disolventes estándar utilizados en ensayos basados en hibridación in situ de
fluorescencia (por ejemplo, etanol, absoluto y de grado)
• Agua destilada o desionizada
• Contratinción DAPI
• Leica HER2 FISH Control Slides (TA9123)
• Leica BOND Aspirating Probe Cleaning System (CS9100)
B. Equipo necesario no suministrado
• Pipetas (para la medición de volúmenes de 1-20 µl y 100 – 1000 µl)
• Portaobjetos cargados (Leica BOND Plus Slides – S21.2113)
• Leica BOND-MAX (21.0051) or Leica BOND-III (21.2201)
• Leica BOND Universal Covertiles
™ (S21.2001)
• Leica BOND Mixing Stations (S21.1971)
• Leica BOND Slide Label & Print Ribbon (S21.4564)
• Cubreobjetos