Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manual (Página 15)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Instrucciones de uso TA9217 ES-CE-Rev_D 08/04/2013
contaminación con otros tejidos o fluidos puede generar artefactos morfológicos, degradación
del ácido nucleico, fluorescencia de fondo o resultados de falsos negativos. Los resultados
inconsistentes pueden deberse a variaciones en los métodos de fijación e inclusión o a
irregularidades inherentes del tejido (21). Una contratinción excesiva o incompleta puede influir
negativamente en la correcta interpretación de los resultados.
La tinción no específica, como resultado de una sonda no unida, tiene un aspecto disperso y
granular y puede visualizarse en el sitio de hibridación previsto o a una cierta distancia. Utilice
células intactas para la interpretación de los resultados de tinción. Las células necróticas o
degeneradas pueden teñirse inespecíficamente (22). Una tinción FISH inesperada o variaciones
en la tinción pueden ser el resultado de alteraciones en los niveles de expresión de los genes
codificantes. Cualquier cambio en los patrones de tinción esperados debe interpretarse en
combinación con el resto de las investigaciones diagnósticas. La interpretación de la tinción
debe complementarse con estudios morfológicos y con el uso del material de control adecuado
y debe evaluarse en el contexto del historial clínico del paciente y de cualquier otra prueba
diagnóstica realizada por un patólogo cualificado.
La determinación del rendimiento del análisis (es decir, la evaluación de la adecuación de los
materiales de control) y la interpretación de cualquier tinción o de la ausencia de la misma
deben llevarse a cabo en un laboratorio debidamente acreditado/autorizado bajo la supervisión
de un patólogo adecuadamente cualificado y experimentado, que será el responsable de
la evaluación global del análisis de hibridación in situ y de su interpretación. Los resultados
de falsos positivos en FISH pueden deberse a la reactividad cruzada de la sonda con otras
secuencias de ácidos nucleicos y/o a la unión inespecífica. Deben utilizarse y documentarse
los controles adecuados y las pruebas deben tener en cuenta todas las fechas de caducidad
relevantes.
La variación técnica y de interpretación también debe considerarse al utilizar FISH en materiales
derivados de líneas celulares (23).
B. Limitaciones específicas del producto
Este producto no está diseñado para utilizarse en otros tipos de ensayos de diagnóstico
basados en ADN.
No sustituya los reactivos de Leica HER2 FISH System - 30 Test por ningún otro componente
suministrado por Leica Biosystems o por cualquier otro fabricante. Al realizarlo, invalidará
el análisis. El usuario debe validar cualquier desviación con respecto a los procedimientos
recomendados.
Se recomienda que en el análisis se utilicen únicamente tejidos fijados con fijadores a base de
formalina. El uso de cualquier otro tipo de fijador invalidará el análisis.
Los cortes de tejido con un grosor diferente al rango recomendado no se han validado. Por
tanto, el uso de cualquier otro grosor de corte puede invalidar el análisis.
Concordancia clínica del Leica HER2 FISH System- 30 Test con el
Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe Kit
Este estudio examinó la adecuación del Leica HER2 FISH System - 30 Test para el uso como ayuda
en la determinación del tratamiento para la terapia con Herceptin (trastuzumab). El estudio se
diseñó para examinar la concordancia entre el Leica HER2 FISH System - 30 Test y un dispositivo
de diagnóstico previamente autorizado, el Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe Kit,
considerado como el "máximo estándar" para este ensayo. El criterio de aceptación para la
prueba fue que el límite inferior del intervalo de confianza unilateral del 95% fuera superior al 90%
entre el Leica HER2 FISH System - 30 Test y el Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe
Kit manual, entre muestras de cáncer de mama invasivo positivas (amplificadas) y negativas
(no amplificadas) fijadas en formalina e incluidas en parafina (FFPE).
El estudio se realizó como una evaluación enmascarada en tres sitios de muestras clínicas