Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System - Manual (Página 16)

Español
Página 16 de 28
Español
Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Instructions for Use TA9145 ES-CE-Rev_E 18/06/2013
Es esencial que en el análisis se utilicen únicamente tejidos fijados con fijadores a base de
formalina. El uso de cualquier otro tipo de fijador invalidará el análisis.
Los cortes de tejido con un grosor diferente al rango recomendado no han sido validados.
Por tanto, el uso de cualquier otro grosor de corte puede invalidar el análisis.
Datos de la línea celular
Línea celular Perfil del Bond
Oracle HER2 IHC
System Carga de receptor
HER2 por célula* Estado de amplificación del gen HER2 +
Número de copia
de HER2 Relación de
genes HER2:Chr17
SK-BR-3 3+ 4,3 x 10 5 13,35 3,55
MDA-MB-453 2+ 1,4 x 10 5 5,73 2,05
MDA-MB-175 1+ 6,3 x 10 4 3,33 1,20
MDA-MB-231 0 9,3 x 10 3 3,15 1,13
*Análisis de la carga de receptor HER2, evaluada mediante citometría de flujo. + Estado de amplificación del gen HER2, evaluada
mediante FISH de doble sonda (HER2:Cromosoma 17).
Tabla 5. Perfil de HER2 Control Slide
Concordancia clínica del Bond Oracle HER2 IHC System vs. Dako
HercepTest
La primera parte del estudio examinó la adecuación del Bond Oracle HER2 IHC System para
utilizarse como una ayuda para la determinación del tratamiento con terapia de Herceptin®
(trastuzumab). El estudio fue diseñado para examinar la concordancia entre el Bond Oracle
HER2 IHC System y el Dako HercepTest, considerado como el "máximo estándar" para este
análisis. El criterio de aceptación se definió como una concordancia global superior al 75%
entre las dos pruebas con un intervalo de confianza (IC) del 95%.
El estudio se llevó a cabo como una evaluación enmascarada realizada en dos sitios de los
EE.UU. A cada sitio se le suministraron muestras de cáncer mamario fijadas con formalina
e incluidas en parafina con estado HER2 conocido. Los casos se seleccionaron en orden
consecutivo inverso a partir de archivos clínicos, que representaban el flujo consecutivo de
casos de un departamento de histopatología para pruebas clínicas, y fueron analizados de
forma independiente a cualquier otro factor pronóstico y/o predictivo, sin introducir ninguna
desviación en la cohorte. Se analizaron cohortes de 160 y 292 muestras en el Sitio 1 y el
Sitio 2, respectivamente. Cada una de las cohortes poseía una distribución equitativa de casos
equívocos/positivos (2+, 3+) y negativos (0, 1+), basada en los grados HER2 IHC previamente
asignados, proporcionando una muestra total del estudio de 452 muestras. Doce (12) muestras
se consideraron inadecuadas debido a la ausencia de suficiente tumor invasivo y fueron
retiradas del estudio. En otras nueve (9) muestras no se pudo determinar el grado de tinción
como resultado del levantamiento del tejido de la superficie del portaobjetos, obteniéndose una
muestra final del estudio de 431 muestras.
Todos los casos se tiñeron con el HercepTest conforme a las instrucciones del fabricante
especificadas en el prospecto. Cortes secuenciales de cada caso se tiñeron con el Bond Oracle
HER2 IHC System instalado en un sistema de tinción avanzado y totalmente automatizado
Leica Biosystems’ BOND. Todos los casos fueron desligados de los datos de identificación del
paciente y se vincularon a datos clínicos relativos al tamaño del tumor, el estadio del tumor, el
grado del tumor y el estado de los receptores de estrógenos.