Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System - Manual (Página 5)

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Español
Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Instructions for Use TA9145 ES-CE-Rev_E 18/06/2013
Español
HER2 Control Slides,
(x15)
Cortes de líneas celulares de cáncer mamario humano fijados con
formalina e incluidos en parafina que acreditan la expresión de la
oncoproteína HER2 a intensidades de 0, 1+, 2+ y 3+ cuando la tinción
se realiza conforme el protocolo suministrado. Dichos cortes están
totalmente adheridos y no requieren un calentamiento adicional.
HER2 Primary
Antibody, 13,5 mL
Contiene el anticuerpo monoclonal IgG de ratón, clon CB11 purificado
por afinidad y listo para usar, así como ProClin
™
950 al 0,35%.
HER2 Negative
Control, 9 mL
Contiene el anticuerpo monoclonal IgG de ratón listo para usar a una
concentración equivalente al HER2 Primary Antibody, así como ProClin
™
950 al 0,35%.
Peroxide Block,
22,5 mL
Contiene peróxido de hidrógeno al 3-4%.
Post Primary, 22,5 mL
IgG de conejo anti-ratón (<10 μg/mL) en salino tamponado con Tris que
contiene suero animal al 10% (v/v) y ProClin
TM
950 al 0,09%.
Polymer, 22,5 mL
IgG de cabra anti-conejo poli-HRP (<25 μg/mL) en salino tamponado con
Tris que contiene suero animal al 10% (v/v) y ProClin
TM
950 al 0,09%.
DAB Part 1, 2,25 mL
Contiene tetrahidrocloruro de 3,3’-diaminobencidina 66 mM, en una
disolución de estabilizador.
DAB Part B (x2),
22,5 mL
Contiene peróxido de hidrógeno a ≤0,1% (v/v).
Hematoxylin, 22,5 mL Contiene hematoxilina a <0,1%.
Tabla 1. Componentes del Bond Oracle HER2 IHC System
Instrucciones de uso
Todos los reactivos suministrados están específicamente formulados para ser utilizados en este
análisis y los números de lote correspondientes son específicos de cada Bond Oracle HER2
IHC System. Para que el análisis resulte válido, no debe sustituirse ninguno de los reactivos.
Almacenamiento y estabilidad
Almacenar a 2–8 °C. No congelar. Volver a enfriar a 2–8 °C inmediatamente después del uso.
Cualquier desviación de estas condiciones invalidará el análisis. Asegúrese de que el Bond
Oracle HER2 IHC System utilizado se encuentra dentro de la fecha de caducidad designada. Los
signos que indican la contaminación y/o inestabilidad del Bond Oracle HER2 IHC System son:
turbidez de las disoluciones, aparición de olor y presencia de precipitado. El almacenamiento
en condiciones diferentes a las arriba especificadas debe ser verificado por el usuario.
Preparación de muestras
Todas las muestras deben prepararse para preservar el tejido que se va a someter a tinción
inmunohistoquímica. Para ello, en todas las muestras deben emplearse los métodos estándares
de procesado de tejidos (12).
Se recomienda preparar los tejidos empleando fijadores a base de formalina, procesarlos de forma
rutinaria e incluirlos en parafina. Así, por ejemplo, las muestras de resección deben bloquearse
a un grosor de 3–4 mm y deben fijarse durante 18–24 horas en formalina tamponada neutra al
10%. A continuación, los tejidos deben deshidratarse en una serie de alcoholes y clarificarse con
xileno, seguido de impregnación con cera de parafina fundida, mantenida a una temperatura
máxima de 60 °C. Las muestras de tejido deben cortarse a un grosor de entre 3 y 5 µm.