Luminex xPONENT 3.1 - Manual (Página 18)

Manual del software Luminex xPONENT 3.1
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Volumen de la muestra
Los volúmenes o tamaños de las muestras varían de 10 a 200 µl. Asegúrese de
que cierta cantidad de la muestra permanezca en el pozo después de la aspiración;
aproximadamente 25 µl más que el volumen de la muestra. Esta cantidad puede variar en
función del tipo de placa utilizada. Después de la adquisición, el analizador Luminex lava
las líneas de muestra, lo cual produce la expulsión de alrededor de 165 µl de fluido de
funda nuevamente dentro del pozo de la placa de 96 pozos. Asegúrese de que haya
espacio para agregar esta cantidad en el pozo sin que se desborde y contamine otros
pozos.
Las restricciones de volumen en el diseño del análisis se pueden exponer mediante la
siguiente fórmula:
Volumen total del pozo (µl) – Volumen de absorción de la muestra (µl) + 165 (µl)
<Volumen máximo del pozo (µl)
• Volumen total del pozo = El volumen de la muestra inicial de un pozo antes de las
muestras de la unidad para la adquisición. El volumen del pozo está determinado por
la consistencia del conjunto de microesferas.
• Volumen de absorción de la muestra = El volumen de absorción para la adquisición
(programe esta característica en el protocolo como volumen de la muestra).
• 165 (µl) = El volumen expulsado según se indica en el párrafo anterior.
• Volumen máximo del pozo de la placa = La capacidad máxima de volumen de los
pozos en una placa de microvaloración de 96 pozos.
Dilución de la muestra
Diluya muestras biológicas concentradas, como plasma o suero, al menos a 1:5 con
reactivos como parte la configuración del análisis o como paso de dilución final. Si ejecuta
un equipo basado en xMAP, siga las directrices de dilución que se encuentran en las
instrucciones de uso del producto.
Reactivos
Los reactivos formulados no deben contener otras partículas que no sean las
microesferas xMAP. No diluya los calibradores ni los verificadores xMAP.
Puertas
Las posiciones de las puertas dependen de la composición de la memoria intermedia.
Los cambios realizados en la composición de la memoria intermedia de un análisis
pueden dar lugar a una ubicación óptima diferente de las puertas.
Extinción máx. (M-1cm-1) 1 960 000 83 800
Emisión máx. (nm) 578 554
Rendimiento cuántico 0,82 0,8
TABLA 2. Longitudes de onda de los fluorocromos informantes
R-Ficoeritrina Alexa 532