Luminex xPONENT 3.1 - Manual (Página 17)

5
Introducción
Laboratory Sink Drains to remove Azide salts” (Gestión de
seguridad N.º CDC-22, Descontaminación de las tuberías
de los sumideros de laboratorio para eliminar las sales de
azida) (Centros de Control de Enfermedades, Atlanta,
Georgia, 30 de abril de 1976).
PRECAUCIÓN: el fluido de funda y la solución donde se almacenan las
microesferas contienen ProClin, que puede causar una
reacción alérgica. Utilice un equipo de protección personal,
incluidos guantes y gafas de seguridad.
Concentración de microesferas
La concentración de microesferas en un análisis constituye un factor en la velocidad del
sistema. Si ejecuta un equipo basado en xMAP, siga las directrices que se encuentran
en las instrucciones de uso del producto o utilice el protocolo del software provisto.
Generalmente se recomienda utilizar entre 2.000 y 5.000 microesferas por objetivo,
según el análisis.
Mediciones de microesferas xMAP repetitivas
En un análisis xMAP, la señal informante es el resultado del análisis. Debido al tamaño
reducido de las microesferas, una suspensión de microesferas xMAP muestra una
cinética de reacción cercana a la fase de disolución. Esto quiere decir que cada conjunto
de microesferas xMAP utilizadas para un análisis determinado mostrará una distribución
estadísticamente uniforme de moléculas informantes ligadas a la superficie de cada
microesfera. Durante la adquisición de datos, se analizan numerosas microesferas de
cada conjunto y el software calcula la mediana de dicho conjunto. Cuantas más
microesferas de un conjunto se midan, más confianza ofrecerá dicha medición. Si ejecuta
un equipo basado en xMAP, siga las directrices que se encuentran en las instrucciones de
uso del producto o utilice el protocolo del software provisto.
Fluorocromos de clasificación e informantes
Cada conjunto de microesferas xMAP está teñido internamente con dos tintas de
clasificación. La señal fluorescente de estas tintas permite la clasificación de cada conjunto
de microesferas. Debido a que cada microesfera se analiza individualmente, aunque se
mezclen los conjuntos en un análisis múltiplex se pueden distinguir por las señales
emitidas. La señal fluorescente de las moléculas informantes ligadas a la superficie de cada
conjunto de microesferas se mide y se utiliza para determinar el resultado de cada análisis
en un múltiplex. Nuevamente, como cada microesfera se analiza individualmente, las
señales informantes de cada conjunto de microesferas se pueden cuantificar con exactitud.
La siguiente tabla muestra los fluorocromos informantes aceptables y sus longitudes de
onda de excitación y emisión.
TABLA 2. Longitudes de onda de los fluorocromos informantes
R-Ficoeritrina Alexa 532
Peso de la fórmula
(Daltones) 240 000 470
Absorbancia máx. (nm) 480, 546, 565 531