Hoefer PR625 Immunoblot - Manual (Página 17)

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Nota 5. Montaje de las juntas tóricas en
las ranuras
Si las unidades de lavado múltiples no encajan en
las ranuras con facilidad, aplique una pequeña
cantidad de grasa de silicona alrededor de las
juntas tóricas. Coloque la unidad del colector
suelto en la ranura y presione hacia abajo en el
lado del colector hacia usted. A continuación,
pulse en el lado opuesto de usted para el asiento
del colector de firmeza en la ranura.
Nota 6. Incubaciones anticuerpo secundario
Por favor, siga las instrucciones incluidas
con el sistema de detección de Western Blot.
Cuando el anticuerpo secundario se utiliza en la
ImmunoBlot en una alta dilución (1:100.000 o
mayor), una cierta disminución en la intensidad
de señal puede ser observada. Esto puede ser
debido al agotamiento de los anticuerpos en
el pequeño volumen del canal. El problema
generalmente puede ser corregido por:
1. Aumentando la concentración de anticuerpos
2-5 veces
2. Aumentando el volumen de anticuerpos, o
3. La eliminación de la membrana de la unidad
y la realización de la incubación del anticu-
erpo secundario en una bandeja.
Nota: Tenga precaución al
realizar las incubaciones de la
bandeja ya que los anticuerpos
de baja afinidad monoclonales
pueden disociarse de sus
respectivos antígenos a través
del tiempo. La incubación en
una bandeja permite tales anti-
cuerpos para difundirse a través
de la solución de incubación y
volver a enlazar en otra parte
de la mancha. Tal rayas es
detectable como tinción entre
los carriles de muestra o en los
carriles de control negativo en la
posición de una o más bandas
fuertemente reactivos.