Luminex xPONENT - Manual (Página 17)

Descripción general
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La siguiente tabla muestra los fluorocromos informantes aceptables y
sus longitudes de onda de emisión y excitación.
Volumen de muestreo
Los volúmenes de muestreo o los tamaños de muestreo varían de 20
a 200 µL. Asegúrese de que que quede algo de la muestra en el pozo
después de la aspiración, aproximadamente 25 µL mayor que el
volumen de muestreo. Esta cantidad puede variar en función del tipo
de placa utilizada. Después de la adquisición, el analizador Luminex
lava las líneas de muestreo con la expulsión de aproximadamente
160 µL de fluido de funda otra vez dentro del pozo. Asegúrese de
que hay espacio para añadir esta cantidad al pozo sin que se desborde
y contamine otros pozos.
Las restricciones de volumen que la cantidad expulsada impone al
diseño del análisis se pueden exponer con la siguiente fórmula:
Longitudes de onda de los fluorocromos informantes
R-Ficoeritrina Alexa 532
Peso de la fórmula
(Daltones) 240 000 470
Absorbancia máx. (nm) 480 546 565 531
Extinción máx. (M
-1
cm
-1
)
1 960 000 83 800
Emisión máx. (nm) 578 554
Rendimiento cuántico 0,82 0,8
Donde: “Volumen total del pozo” (µL) – “Volumen de absorción
de muestra”(µL) + 160(µL) <Volumen máximo del pozo (µL)
Volumen total del
pozo El volumen de muestreo inicial de un
pozo antes de las muestras de la unidad
para la adquisición.
Volumen de
absorción de la
muestra El volumen de absorción para la
adquisición (programe esto en el
protocolo como volumen de muestreo)
160µL El volumen expulsado como se indica en
el párrafo anterior.
Volumen máximo del
pozo de la placa La capacidad de volumen máxima de los
pozos en una placa de microvaloración de
96 pozos seleccionada de un usuario.