Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manual (Página 20)

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Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Instrucciones de uso TA9217 ES-CE-Rev_D 08/04/2013
Al enumerar los portaobjetos teñidos en el estudio de precisión interciclo, 891/900 muestras
evaluadas mostraron un resultado concordante con una concordancia total del 99,00% con
un IC 95% inferior de 98,11%.
J. Estudio de precisión interlaboratorio
El estudio de precisión interlaboratorio se realizó de un modo enmascarado y aleatorio. El
estudio de precisión interlaboratorio del Leica HER2 FISH System - 30 Test se evaluó entre
tres sitios de investigación en 513 muestras de TMA previamente caracterizadas con HER2
que contenían muestras de cáncer mamario fijadas en formalina e incluidas en parafina. El
uso de las TMA para la determinación de la prueba de precisión interlaboratorio permitió un
gran número de muestras que cubrió un rango más amplio de la expresión del HER2 entre
ciclos en distintos instrumentos.
Al enumerar los portaobjetos teñidos en el estudio de precisión interlaboratorio,
511/513 muestras evaluadas mostraron un resultado concordante con una concordancia
total del 99,61% con un IC 95% inferior de 98,60%.
K. Estudio de precisión interobservador
El estudio de precisión interobservador se realizó de un modo enmascarado y aleatorio.
La prueba de reproducibilidad interobservador del Leica HER2 FISH System - 30 Test se
evaluó en tres sitios de investigación. Se utilizó un único observador experimentado en
cada sitio de investigación. Se utilizaron dieciocho muestras de cáncer de mama de corte
completo para la precisión interobservador, que reflejaban los tipos de muestra utilizados
en los estudios clínicos.
Al enumerar los portaobjetos teñidos en el estudio de precisión interobservador, 53/54
muestras evaluadas mostraron un resultado concordante con una concordancia total del
98,15% con un IC 95% inferior de 90,11%.
L. Estudio de precisión entre lotes
El estudio de precisión entre lotes se realizó de un modo enmascarado y aleatorio. La
precisión entre lotes se determinó en tres lotes fabricados independientemente del Leica
HER2 FISH System - 30 Test , fabricados según las Buenas prácticas de fabricación (GMP).
Cada lote se probó en un único sitio de investigación en 540 muestras de TMA previamente
caracterizadas de HER2 que contenían muestras de cáncer de mama fijadas en formalina e
incluidas en parafina. El uso de las TMA para la determinación de la reproducibilidad entre
lotes permitió un gran número de muestras que cubrió un rango más amplio de la expresión
del HER2 probada entre lotes.
Al enumerar los portaobjetos teñidos en el estudio de precisión entre lotes, 540/540 muestras
evaluadas mostraron un resultado concordante con una concordancia total del 100% con un
IC 95% inferior de 99,45%.
Solidez del análisis
Se llevaron a cabo estudios de solidez en el Leica BOND-MAX and BOND-III System para
determinar el rango de tolerancia del ensayo para el tiempo y la temperatura de recuperación
del calor, el tiempo de recuperación del enzima, la temperatura y la concentración, el tiempo
y la temperatura de desnaturalización, el tiempo y la temperatura de hibridación y el tiempo
y la temperatura del lavado astringente. Los estudios de solidez mediante el protocolo
predeterminado del Leica BOND-MAX and BOND-III System también se realizaron fuera de los
límites recomendados, tal como se han definido en el manual de instrucciones de FDA/ORA ORA
LAB5.3 Rev1.7 para la temperatura y la humedad.
• No se observó ninguna diferencia en el estado de amplificación si la temperatura
predeterminada para cada paso dependiente de calor se aumentaba en 4 °C o se disminuía
en 4 °C, si se comparaba con el protocolo predeterminado del Leica HER2 FISH System