Hoefer SE615 - Manual (Página 22)

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síntoma posible causa acción recomendada
APS insuficiente o
TEMED.
Pila de APS está
mojado.
O
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en solución de gel.
Soluciones a baja
temperatura.
TEMED es viejo.
No hay suficiente
reticulante.
Demasiado bis mucho.
Demasiado bis mucho.
Demasiado catalizador:
gel polimerizado en
<10 min.
No catalizador sufici-
ente: gel polimerizado
en >50 min.
Soluciones que no
estén mezclados.
La muestra no
contiene mismo
tampón como gel de
apilamiento.
Demasiado TEMED
o APS.
Tampón SDS o de la
muestra es viejo.
Interfaz entre los pobres
gel de separación y el
gel de apilamiento.
Polimerización incom-
pleta.
Geles de acrilamida o
de edad avanzada.
El gas en gel.
Acrilamida o bis
contienen ácido acrílico.
El agua es impura.
8. N polimerización de
gel de SDS (o polimer-
ización incompleta.)
9. Gel demasiado
blandos.
10. Gel es frágil.
11. Gel es de color
blanco.
12. Gel contiene
remolinos, artefactos
de polimerización.
13. Las bandas son
difusas o amplia.
14. Movilidades de
proteínas no son
constantes.
15. De fondo pesado
durante la tinción de
plata.
Aumentar tanto la APS y TEMED en un 30-50%.
Solución de APS es viejo. Maquillaje APS nuevo
cada día.
APS es higroscópico. Abra una nueva botella.
Degas al menos 10 minutos.
Asegúrese de que todas las soluciones están a
temperatura ambiente (20-30 °C).
Utilice el nuevo TEMED.
Reticulador debe ser 2,6% de C para el estándar
de geles de SDS donde
%C = g bis × 100
(g monomer + g bis)
Vea el # 9.
Ver las concentraciones de las soluciones.
Vea el # 9.
Reducir tanto APS y TEMED un 25%.
Aumentar tanto APS y TEMED un 50%.
También vea el # 8.
Mezcle bien después de añadir TEMED.
Utilizar el mismo tampón para la muestra como
para el gel de apilamiento.
Reducir las concentraciones de un 25%.
Utilizar soluciones frescas.
Eliminar todo el líquido desde la superficie del gel
de separación antes de añadir las soluciones de
gel de apilamiento.
Vea el # 8.
No almacene la acrilamida líquido más de 3
meses. Utilice geles dentro de 1-2 semanas de
casting. Utilice geles con apiladores de inmediato.
Degas gel de soluciones al menos 10 minutos.
Utilizar reactivos especificados como pureza elec-
troforesis.
Utilice sólo agua doblemente destilada.