Hoefer SE615 - Manual (Página 12)

Verter estándar geles
homogéneos
Tabla 3. Ruedas de gel y el volumen
requerido
gel de ruedas volumen requerido gradiente fabricante
(ml) tamaño*
SE615 190–500 SG500
SE675 60 –150 SG100 o
SG500
*El tamaño real depende del volumen calculado.
1
Preparar y solución desgasificar monómero sufici-
ente para llenar todos los emparedados al nivel de la
placa dentada.
La siguiente fórmula permite solución adicional para
llenar el espacio entre el sandwich y la cámara:
N gel de apilamiento. Solución de llenado hasta justo
debajo de la parte superior de la placa dentada. Si
las bolsas de aire forman, retire con una pipeta o una
jeringa. Introducir un peine, con un ligero ángulo, en
cada sándwich, teniendo cuidado de no atrapar el aire
debajo de los dientes.
Gel de apilamiento. Completa solución a 4 cm por
debajo de la parte superior de la placa de vidrio
rectangular. Esta altura permite 1 cm de gel de apila-
miento por debajo de los pozos. Verter el gel y apli-
car una superposición. Después el gel se establece,
preparar el gel de apilamiento, como se describe en la
página 15.
2-D electrophoresis. Completa solución a aproxima-
damente 1,0 cm por debajo de la parte superior de
la placa de vidrio rectangular. Esta altura permite
4 a 5 mm de espacio para la tira IPG y un sello de
agarosa. Superponer el gel de separación como se
describe en el paso 3.
¡Advertencia! La acrilamida es
una neurotoxina. Utilice guantes
al manipular la acrilamida
o poliacrilamida. Use una
máscara contra el polvo la hora
de sopesar la acrilamida o la
preparación de las poblaciones
de acrilamida.
•
p9
Nota: El multiplicador de 1,1
en esta fórmula asegura una
solución suficiente para llenar el
volumen muerto. Monomer vol. = altura × ancho × espaciador × número total × 1,1
(ml)
(cm) (cm) espesor (cm) gel sandwiches