Hoefer SE615 - Manual (Página 14)

Verter los geles de gradiente
estándar
Véase la Fig. 1 en la página 4 para un diagrama
de los componentes lanzador. Consulte el
apartado “Configuración máquina colada” en
la página 5 para los volúmenes de solución
recomendada.
Configuración de la máquina de gradiente
1
Preparar una solución de glicerol desplazamiento
50% que contenía una pequeña cantidad de azul de
bromofenol: aproximadamente 75 ml para el SE615 y
35 ml para el SE675.
2
Calcular la cantidad de solución de gradiente tendrá
haciendo referencia a la fórmula en la página 9.
Para geles unidimensionales: Utilice un gel de separa-
ción de 12 cm con un gel de 4 cm de apilamiento.
Para geles de dos dimensiones utilizando tiras IPG:
Calcular la cantidad de solución necesaria para llenar
los bocadillos a aproximadamente 0.5-1.0 cm por
debajo de la parte superior de las placas.
3
Configure la bomba peristáltica. Usando un cilindro
graduado y agua, ajustar la velocidad de flujo de
modo que el volumen de la solución de separación de
gradiente más el volumen de la solución de glicerol
será completamente entregado en 10-15 minutos.
4
Elija un fabricante de gradiente que contiene no
más de cuatro veces el volumen total de solución de
gradiente que se vierte. Compruebe que el fabricante
de gradiente es limpia y que la toma y el puerto de
mezcla son libres de acrilamida polimerizada.
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