Hoefer SE215 - Manual (Página 9)

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Purgar la solución de monómero y añadir el iniciador
y el catalizador justo antes de verter el gel. Completa
la solución en sólo un emparedado, permitiendo la
ranura en el tapón de fondo para distribuir la solución
uniformemente entre todos los emparedados. (Verter
en más de un sándwich podría introducir burbujas de
aire.) Vea el nivel de la solución a través de la placa
frontal. Véase más abajo para el nivel de la solución
apropiada de acuerdo con la aplicación.
No gel de apilamiento
Llenar con solución hasta justo debajo de la parte
superior de la placa dentada. Si las bolsas de aire
forman, retírelos con una pipeta o una jeringa.
Introducir un peine (con un ligero ángulo) en cada
emparedado, teniendo cuidado de no atrapar el aire
bajo los dientes.
Gel de apilamiento
Llenar con solución de 3 cm por debajo de la parte
superior de la placa de vidrio rectangular. Esta altura
permite 1 cm de gel de apilamiento por debajo de los
pozos. Verter el gel y aplicar una superposición. (Véase
el paso 3). Después el gel se establece, preparar el gel
de apilamiento, como se describe a continuación.
2-D electroforesis
Llenar con solución a aproximadamente 1 cm por
debajo de la parte superior de la placa de vidrio rect-
angular. Esta altura permite 4 a 5 mm de espacio para
la franja de IPG y un sello de agarosa). Superponer el
gel de separación como se describe en el paso 3.
3
Si fundición geles de poliacrilamida, superponer
cada gel con una delgada capa de agua saturada de
n-butanol, agua o tampón de gel diluida para evitar la
exposición al oxígeno de gel. Aplicar la misma canti-
dad a cada gel para mantener los niveles de gel de la
misma. Entregar la solución de superposición lenta-
mente cerca del espaciador en el lado del sandwich.
Dejar que la solución a fluir a través de la superficie
sin ayuda.
4
Permitir que el gel se polimeriza durante un mínimo
de 1 hora. Consulte la página 12 para el desmontaje
de pila.
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p7
Nota: Evitar el contacto repetido
y prolongado de n-butanol con
la cámara de colada acrílico
para evitar que el acrílico se
convierta opaco.