Hoefer SE215 - Manual (Página 12)

gel necesario gradiente tamaño
caster vol. serie (ml) máquina*
SE215 55–100 SG100
SE235 32–56 SG50 o SG100
SE275 22–40 SG30 o SG50
*El tamaño real depende del volumen calculado.
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Preparar soluciones
Plug solución
Preparar una solución tapón suficiente (50% de
sacarosa o 75% de glicerol en 1X tampón de gel de
separación) para llenar el espacio por debajo de los
emparedados. El SE215 requiere alrededor de 30 ml
y el SE235 o SE275 requiere aproximadamente 15
ml. La solución se bombea en el enchufe después
del gradiente para desplazar toda la solución de
monómero en la pila de sándwich.
Opcional: agregar azul de bromofenol para ayudar a
rastrear el enchufe, ya que se bombea en la máquina
de colada de gel múltiple.
Monómero de solución de
Siga las instrucciones en la página 6, paso 1 para
calcular el volumen total de solución de monómero
sea necesario. Dividir el volumen total en medio y
preparar este volumen de cada una de las soluciones
de acrilamida superiores e inferiores%.
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Verter el “pesado” solución en la cámara de depósito
(la cámara más alejada de la salida). Abrir la llave de
paso el tiempo suficiente para desplazar el aire en la
conexión entre las cámaras y luego cerrar. Llene la
solución la luz en la cámara de mezcla y coloque una
barra de agitación en esta cámara. Coloque el fabri-
cante de gradiente en un agitador magnético y comen-
zar de agitar a un ritmo que no introducir burbujas en
la solución.
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p10
Nota: 15% de sacarosa sólido
(w/v) o 25% de glicerol (w/v) en
el “pesado” solución minimiza
la mezcla y estratificación
ayudas gradiente.