Eppendorf AF2200 Plate Reader - Manual (Página 39)

Manejo
Eppendorf ® PlateReader AF2200
Español (ES)
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6.2.4 Mediciones multimodo
El software ofrece mediciones multimodo. Esto significa que se pueden realizar 10 mediciones por placa /
área de la placa (patrón) en los modos absorbancia, intensidad de fluorescencia o una combinación de
ambos.
6.2.5 Mediciones con modo de relación (= mediciones en función de la onda)
La ejecución en función de la onda de una o varias mediciones se limita a 4 tiras de medición consecutivas
del mismo modo.
6.3 Optimización de las mediciones de fluorescencia
Los resultados de la medición de fluorescencia pueden optimizarse mediante la adaptación de los
parámetros siguientes del equipo, por un lado, y mediante la selección de los materiales adecuados, por
otro lado.
6.3.1 Amplificación de la señal
El sistema de detección de fluorescencia utiliza una transformación CAD de la señal del PMT (CAD:
conversión analógica-digital). La amplificación de la señal (= ganancia) determina la amplificación de la
señal del PMT en la transformación de la luz fluorescente a corriente eléctrica. La CAD requiere, por un
lado, una corriente de PMT suficientemente alta para generar una relación señal/ruido (S/N) adecuada y,
por otro, linealidad. Por esta razón, la amplificación de la señal debería ajustarse de modo que los pocillos
en las microplacas con la máxima concentración ofrezcan los resultados de medición más altos posibles.
Entonces las intensidades de señal de los pocillos en las microplacas con concentraciones reducidas
también se desvían del fondo – siempre y cuando el ruido de fondo lo permita.
6.3.2 Características de PMT
La amplificación de la señal para la intensidad de fluorescencia puede seleccionarse en un área de 1 – 255.
La potencia de PMT depende de la tensión de suministro. Los PMT están concebidos para un área de 300 a
1250 V. La relación entre el ajuste de amplificación de la señal y el suministro de corriente se describe en la
ecuación inferior. El área de tensión de suministro recomendada del PMT corresponde a los ajustes de
amplificación de la señal entre 60 y 255. Los ajustes de amplificación de la señal por debajo de 60 son
posibles y pueden ser útiles para aplicaciones especiales pero el PMT no está diseñado para una tensión de
suministro permanente de < 300 V. Eppendorf no es responsable de los resultados de medición con un
ajuste de amplificación de la señal por debajo de 60.
Si un pocillo tiene el estado de "OVER" (overflow, exceso de flujo), puede reducir la
amplificación de la señal o seleccionar una amplificación automática (véase el manual de
instrucciones del software).
V 1250 *
255
Gain
U =